全酶,又稱結(jié)合酶,除了蛋白質(zhì)組分外,還含有對熱穩(wěn)定的小分子物質(zhì),前者稱為酶蛋白,后者稱為輔因子。酶蛋白和輔因子單獨存在時,均無催化活力,只有二者結(jié)合成完整的分子時,才具有活力。此完整的酶分子稱為全酶。對于大多數(shù)化學(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì)的酶來說,按照化學(xué)組成可分為單純酶和結(jié)合酶兩大類。全酶=酶蛋白+輔因子輔因子主要指金屬離子、輔酶和輔基。具有催化活性的全酶,包括所有酶蛋白、必需的亞基、輔基和其它的輔助因子。
測定法:
酶蛋白濃度測定的方法:酶濃度嚴(yán)格來說是指酶分子的質(zhì)量濃度,常以酶蛋白濃度來表示。人體體液中的酶有幾百種,除LPS、LCAT、ChE、銅氧化酶(CER)外,大多數(shù)酶的含量在μg/L水平甚至更低。因此,酶活性濃度的測定是主要測定方法。20世紀(jì)70年代以后,隨著新技術(shù)特別是免疫學(xué)技術(shù)的發(fā)展,酶的定量分析技術(shù)中出現(xiàn)了許多利用酶蛋白的抗原性,通過抗原抗體反應(yīng)直接測定酶蛋白質(zhì)量的新方法。國內(nèi)外曾使用電泳法、柱層析法、免疫化學(xué)法等測定酶濃度,其中以免疫化學(xué)法應(yīng)用較廣。免疫化學(xué)法是利用酶蛋白的抗原性,制備特異性抗體后用免疫學(xué)方法測定酶濃度。用于酶濃度測定的免疫化學(xué)方法有:免疫抑制法、免疫沉淀法、放射免疫測定(RIA)、化學(xué)發(fā)光免疫測定(CLIA)、酶免疫測定(EIA)、熒光酶免疫測定(FEIA)等。其中,前兩種方法可用于酶活性濃度測定,其他方法則用于酶蛋白濃度測定。