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在線粒體中通過氧化磷酸化由ATP合成酶合成,或者在植物的葉綠體中通過光合作用合成。ATP合成的主要能源為葡萄糖和脂肪酸。每分子葡萄糖先在細胞質基質中由酶催化產生2分子丙酮酸同時產生2分子ATP和4個還原性氫,產生的能量可以使2分子ADP與磷酸結合生成ATP。最終在線粒體中通過三羧酸循環產生最多38分子ATP。
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